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    89Zr标记CAR-T细胞在小鼠异位移植瘤模型体内分布研究
    发表时间:2019-08-11
    实验目的:
    PET 分子影像方法具有活体显像、动态定量、自身对照、连续观察等突出优点。通过89Zr标记及小动物PET/CT技术,在活体条件下研究CAR-T细胞在小鼠异位移植瘤模型体内分布特征。

    实验方法:
    小鼠异位移植瘤模型,分为2组,其中,实验组尾静脉单次注射89Zr-CAR-T细胞;对照组尾静脉单次注射89Zr-对照T细胞。并在给药后2 h、24 h、72 h和168 h进行小动物PET/CT扫描。扫描采集结束后,对PET图像进行分析,勾画感兴趣区域(Region of Interest,ROI),计算%ID/g值,分析89Zr-CAR-T和对照T细胞在小鼠异位移植瘤模型体内主要脏器和肿瘤的分布情况。

    实验结果:
    标记质控:
    89Zr-CAR-T细胞:比活度为0.6 µCi/10^6 cells,细胞活率为98%,放射性化学纯度为98%,满足实验需求。
    89Zr-对照T细胞:比活度为0.7 µCi/10^6 cells,细胞活率为99%,放射性化学纯度为98%,满足实验需求。
    89Zr-CAR-T细胞标记前后细胞杀伤力无显著性差异。



    动物PET/CT扫描实验:
    静脉注射后,放射性物质主要分布于脾、肝和肺等脏器。给予89Zr-CAR-T后,肿瘤的放射性摄取逐渐增加,而给予89Zr-对照T细胞组的肿瘤放射性摄取值很低,与肌肉(本底)相当。从各时间点的靶本比(即肿瘤与肌肉放射性物质摄取值的比值)来看,给予89Zr-CAR-T细胞组的靶本比逐渐升高,在168 h时靶本比为35.86,而给予对照T细胞组的靶本比仅为0.99,表明89Zr-CAR-T对肿瘤细胞具有靶向性。


    结论:
    建立89Zr标记CAR-T细胞和对照T细胞的有效方法,并进行小动物PET/CT显像观察89Zr-CAR-T和89Zr-对照T细胞在小鼠异位移植瘤模型体内的分布。研究表明,静脉注射后,放射性物质主要分布于脾、肝和肺等脏器。与对照组89Zr- T细胞相比, 89Zr-CAR-T细胞在肿瘤有明显的放射性物质摄取,表明89Zr-CAR-T细胞对肿瘤细胞具有靶向性。

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